صفحه اصلیگزارش آماریکتابخانه های مرکزیراهنماورود
رکورد قبلیرکورد بعدی
Main Entry : Zahir - Jouzdani, Foroughe
Title Proper : Transforming growth factor- beta 1 (TGFβ1) siRNA delivery through thiolated chitosan nanoparticles for reducing scar formation after tissue injuries
other Title Information : : رسانش si RNA برعلیه TGFβ1 توسط نانوپارتیکل های تیوله ی کایتوزان به منظور جلوگیری از شکل گیری اسکار بعد از آسیب های بافتی
First Statment of Responsibility : \ فروهه ظهیر جوزدانی
Supervisor : Fatemeh Atyabi, Rasoul Dinarvand
Advisor : Masoud Soleimani, Ehsan Arefian, Mirgholamreza Mahbod, Saeed Shahhoseini
College : : Talent University of Medical Sciences, Faculty of Pharmacy
Academic Year : , 2018
degree : P.hD. in pharmaceutical nanotechnology
present date : 1397/03/20
page No : 80p.
Abstract : Corneal haze and fibrosis, commonly caused by deep physical and chemical injuries, can greatly impair vision. Growth factors facilitate fibroblast proliferation and differentiation, which leads to haze intensity. In this study, the potential effect of Transforming growth factor beta-1 (TGFβ1) siRNA delivering through positively charged polymers (thiolated-chitosan (TCS) nanoparticles and polyethyleneimine (PEI) NPs) on inhibition of fibroblast proliferation, fibroblast to myofibroblast differentiation, neovascularization, extracellular matrix (ECM) deposition, and pro-fibrotic cytokine expression was examined. Moreover, the effect of CS and TCS, by themselves, as famous polymers with wound healing properties was examined in this regard. The NPs characterizations were done regarding NPs size, PDI, zeta-potential, loading efficiency and cytotoxicity. To evaluate the fibrotic genes suppression, TGFβ1 gene, as a major cause of inflammation-related fibrosis after injuries, was induced by interleukin-6 (IL6) in isolated human corneal fibroblasts. Thereafter, expression levels of TGFβ1, Platelet-derived growth factor (PDGF), α-smooth muscle actins (α-SMA), collagen type I (Col I), fibronectin (Fn) and vascular endothelial growth factor (VEGF) were quantified using qRT-PCR after treating cells with TGFβ1 siRNA PEI NPs, TGFβ1 siRNA CS NPs and TGFβ1 siRNA TCS NPs. Also, effect of blank vehicle (TCS, CS and PEI) on gene suppression was examined. To assess wound-healing capacity, TGFβ1 siRNA NPs- and TCS-treated mice were examined for α-SMA positive cells, collagen deposition, inflammatory cells and neovascularization through pathological immunohistochemistry. The results revealed that TGFβ1 siRNA could efficiently loaded in TCS and PEI NPs. However, PEI demonstrated higher loading capacity for negatively charged siRNA. The loading efficiency of PEI NPs was almost 1000 folds higher than TCS/CS (4 μg vs. 3 mg respectively) while no cytotoxicity related to PEI or TCS/CS was detected at the concentration used in the experiments. Furthermore, both formulations exhibited excellent stability during long term electrophoresis and also heparin exchange method. According to the data obtained from qRT-PCR, surprisingly, it was shown that blank CS and TCS, by themselves, could down-regulate the expression levels of TGFβ1 and PDGF comparable to TGFβ1 siRNA loaded in CS, TCS NPs which means that the anti-fibrotic effect is due to wound healing properties of the polymer without any synergistic effect with TGFβ1 siRNA. Also, the anti-fibrotic properties of the TCS and CS were comparable to TGFβ1 siRNA loaded in PEI NPs (81±1.2 vs. 93±2.4 TGFβ1 gene suppression by TCS and PEI NPs, respectively). Moreover, VEGF as main cytokine related to angiogenesis was down-regulated in both treated groups with PEI NPs and TCS which make the mentioned therapeutics valuable for targeting neovascularization. The in vivo data also confirmed the in vitro results. Myofibroblasts proliferation, as one of the major causes of corneal haze after injuries, was reduced in treated cornea with TGFβ1 siRNA loaded in PEI NPs and TCS polymer. IHC staining of treated cornea with α-SMA and CD34+ antibodies showed efficient prevention of myofibroblasts differentiation and angiogenesis 21 days after treatment, respectively, while in negative control group, more than 4 new vessels and 30 myofibroblasts were detected at 1000x magnification. Furthermore, corneal extra-cellular matrix deposition was diminished with significant superiority as compared to the betamethasone treated cornea. According to these findings, CS and TCS could be considered as an anti-fibrotic, anti-inflammatory and anti-angiogenic therapeutic which have the potency comparable to TGFβ1 siRNA loaded in PEI NPs as a novel biotechnological class of therapeutics. Also, PEI NPs care introduce as efficient vehicle for corneal topical gene and siRNA delivery.
: سوختگی های شیمیایی قرنیه توسط مواد شیمیایی به عنوان مهم ترین عامل کوری قرنیه شناخته می شوند. کوری قرنیه در نتیجه ی افزایش بیان ژن سیتوکین های التهابی از جملهTGFβ1 ایجاد می گردد که طی آن قرنیه دچار فیبروز گردیده و شفافیت خود را از دست میدهد. با توجه به اهمیت درمان فوری در این زمینه, در این مطالعه تاثیر رسانش TGFβ1 siRNAو هم چنین پلیمر کایتوزان به عنوان ترمیم کننده ی زخم بعد از سوختگی های شیمیایی قلیایی قرنیه مورد بررسی قرار گرفته است. در این مطالعه رسانش TGFβ1 siRNA.با استفاده از نانو پارتیکلهای ساخته شده از پلیمر پلی اتیلن ایمین به سلولهای فیبروبلاستی قرنیه با موفقیت به انجام رسید در حالی که هیچ گونه اثر سمیت از فورمولاسیون فوق الذکر مشاهده نگردید. در مطالعات سلولی ثابت گردید که فورمولاسیون نانوپارتیکل حاوی TGFβ1 siRNA و پلیمر کایتوزان قابلیت ساپرس ژن های التهابی و فیبروتیک را در فیبروبلاستهای قرنیه دارا هستند. هم چنین هر دو دارو دارای خواص آنتی آنژیوژنیک نیز می باشند. مطالعات حیوانی نیز داده های سلولی را تایید کرده و نشان داده شد که استفاده از نانوپارتیکلهای حاویTGFβ1 siRNA و یا پلیمر کایتوزان تیوله بلافاصله بعد از سوختگی های شیمیایی قرنیه درمانی موثر برای پیشگیری از کوری قرنیه می باشد. در مطالعات انجام شده, درمانهای یاد شده به طور موثری مانع تکثیر فیبروبلاستها و تبدیل شدن آنها به میوفیبروبلاستها گردید در حالی که ترشح بیش از حد ماتریکس خارج سلولی نیز محدود شده و در نتیجه از فیبروز بافت جلوگیری به عمل می آید. فرمولاسیون نانوپارتیکلهای پلی اتیلن ایمین حاویTGFβ1 siRNA به عنوان فورمولاسیونی ساده و در عین حال بسیار موثر برای رسانشTGFβ1 siRNA به سطح سلولهای قرنیه معرفی می گردد. هم چنین ثابت شد پلیمر کایتوزان در فرم تیوله نیز دارای خواص آنتی فیبروتیک بسیار قوی و قابل مقایسه با TGFβ1 siRNA می باشد. دو داروی قید شده در بالا را می توان به عنوان جدیدترین و موثرترین درمانها برای پیشگیری از فیبروز بافتی معرفی کرد.
Descriptor : Corneal haze
: Chitosan
: Thiolated-chitosan
: TGFβ1
: PDGF
: Myofibroblast
: PEI
: Gene delivery
: کایتوزان
: کایتوزان تیوله
: رسانش ژن به قرنیه

ارسال پیغام

آمار سامانه

تعداد دانشگاه ها :63
تعداد پایان نامه ها:285081
آخرین بروزرسانی:۱۳۹۷/۱۲/۲۸
کاربران آنلاین:303
بازدید امروز:555
بازدید کل:2350070

تماس با ما

شهرک قدس، بلوار فرحزادی، بلوار ایوانک، ساختمان مرکزی وزارت بهداشت، درمان وآموزش پزشکی، بلوک A، طبقه ۱۳، معاونت تحقیقات و فناوری ، مرکز توسعه وهماهنگی اطلاعات وانتشارات علمی، گروه اطلاع رسانی پزشکی

تلفن تماس: 81454318-021

توجه

کلیه حقوق این وب سایت و مطالب آن متعلق به مرکز توسعه و هماهنگی اطلاعات و انتشارات علمی معاونت تحقیقات و فناوری وزارت بهداشت، درمان و آموزش پزشکی بوده و هر استفاده از مطالب آن با ذکر منبع بلامانع است

DEVELOPED BY PARSAZARAKHSH
COPYRIGHT BY THESIS.RESEARCH.AC.IR ALL RIGHT RESERVED, IRAN, TEHRAN